大蛇丸试炼是火影忍者手游中一个具有挑战性的玩法模式，玩家需要掌握特定技巧才能顺利通关。该模式的核心机制是6名玩家中随机1名成为实验体（BOSS），其余5名需要协作击败或躲避实验体。实验体拥有霸体状态、高攻高移速且无法被抓取，因此正面硬拼并非明智选择。选择忍者时需优先考虑位移能力或远程消耗型角色，例如干柿鬼鲛、奈良鹿丸、赤砂之蝎等，这些忍者能通过技能特性保持安全距离输出。
实验体移速较慢但技能范围广，建议利用Y轴上下移动规避攻击，尤其在关灯阶段应停留在场地两端楼梯位置，避免因视野受限被突袭。作为联军方，每次释放技能前需观察实验体是否已使用一技能，若其处于技能真空期则可安全消耗。若被选为实验体，需保留二技能作为远程输出手段，近身时使用一技能压制对手，利用血厚优势对拼换血。
光门是触发隐藏要素晓大蛇丸的关键，进入后需击打左上角蛇头以激活第六关的晓大蛇丸BOSS战。该BOSS会释放红色反伤护罩，需停止攻击专注走位，待其虚弱阶段再集中输出。评分系统会根据存活时间、伤害量等数据计算，若联军方处于劣势可选择主动送BOSS以保排名奖励，但需确保非最后阵亡者。
推荐携带一字连柱或豪火球等具有百分比加成或破霸体效果的秘卷，普攻回血、普攻加奥义点等增益型天赋能显著提升续航能力。若发现卡墙BUG等异常情况，可通过替身术卡入墙体规避伤害，但需注意该操作可能违反游戏规则。最终通关需平衡输出与生存，通过多次练习熟悉BOSS行动模式方能稳定取胜。
